Vyšetrenie počtu vajíčok a metódy asistovanej reprodukcie

Snaha o počatie dieťaťa môže byť pre niektoré páry náročná a vyžaduje si pomoc asistovanej reprodukcie. Umelé oplodnenie (IVF) je jednou z najuznávanejších a najúčinnejších metód asistovanej reprodukcie, pri ktorej dochádza k oplodneniu vajíčka spermiou mimo maternice. V tomto článku sa zameriame na dôležitosť vyšetrenia počtu vajíčok, metódy asistovanej reprodukcie a faktory ovplyvňujúce úspešnosť IVF.

Asistovaná reprodukcia a metóda IVF

Pri snahe o počatie dieťaťa dnes pre páry, ktoré majú problém s neplodnosťou, existuje niekoľko možností asistovanej reprodukcie. IVF metóda je jednou z najuznávanejších a najúčinnejších. Tento krok podstúpite len v prípade, že sa na umelé oplodnenie budú využívať vaše vlastné vajíčka.

Dôležitosť počtu zrelých vajíčok pri IVF

Aby bol celý proces IVF čo najúspešnejší, je dôležité mať k dispozícií väčší počet zrelých vajíčok. Prirodzene sa počas ovulácie uvoľňuje len jedno vajíčko (oocyt), preto je nutné použiť syntetické hormóny na stimuláciu vaječníkov. Tieto lieky sa užívajú vo forme podkožných injekcií alebo tabletiek. Pacientky si ich aplikujú samy po zaškolení odborníkom podľa vopred stanoveného presného harmonogramu. Počas tohto procesu vyvolávania ovulácie pravdepodobne niekoľkokrát navštívite kliniku IVF a lekár pomocou ultrazvuku a krvných testov skontroluje, či všetko prebieha podľa plánu.

Odber vajíčok: Miniinvazívny zákrok

Odber vajíčok prebieha 34-36 hodín po poslednej hormonálnej injekcii na samotnej klinike IVF. Ide o miniinvazívny a takmer bezbolestný zákrok, ktorý trvá približne 5-15 minút. Vykonáva sa v krátkej anestézii, pred ktorou vám aplikujú do žily sedatíva a lieky proti bolesti. Na odber vajíčok sa najčastejšie využíva transvaginálna aspirácia pod ultrazvukovou kontrolou. Do vagíny je vložená ultrazvuková sonda a pod jej kontrolou sa ďalej zavádza tenká ihla, ktorá prenikne až do vaječníka. Tam sa opatrne nasajú z folikulov dozreté vajíčka a následne sa umiestnia do kultivačného média. Z narkózy sa preberiete takmer okamžite po výkone a ďalšie 2 hodiny budete sledovaná na dospávacej izbe.

ŠPECIALISTI - Všetko čo potrebujete vedieť o umelom oplodnení 1/2

Odber spermií a oplodnenie vajíčok v laboratóriu

Ak sa rozhodnete použiť na umelé oplodnenie spermie svojho partnera, poskytne vzorku spermií v ordinácii lekára alebo na klinike IVF prostredníctvom masturbácie v deň odberu vašich vajíčok. V niektorých prípadoch sú potrebné iné metódy odberu spermií, ako napríklad aspirácia semenníkov (extrakcia spermií priamo zo semenníka pomocou tenkej ihly alebo chirurgicky). Oplodnenie prebieha mimo maternice, v laboratóriu, počas 3 až 6 dní nasledujúcich po odbere.

Predimplantačné genetické testovanie (PGT)

Vo vopred určených prípadoch sa po úspešnom oplodnení vajíčok vykonáva aj predimplantačné genetické testovanie (PGT). Zvyčajne na 5.-6. deň, keď embryá dosiahnu požadované štádium, sa z nich odoberie malá vzorka. Tá sa následne testuje, aby sa zistila prítomnosť prípadných genetických porúch.

Embryotransfer a overenie úspešnosti IVF

Realizuje sa vo vopred dohodnutom termíne, zvyčajne na 3. až 6. deň po odbere vajíčok. Samotný výkon trvá štandardne do niekoľkých minút a prebieha bez anestézie. Do maternice sa cez pošvu zavedie katéter (tenká ohybná hadička), cez ktorý sa zo striekačky prenesie vopred dohodnutý počet embryí. Po tejto procedúre môžete pokračovať ďalej v bežných denných činnostiach. Náročnejšie fyzické aktivity však radšej ešte na niekoľko dní vynechajte. To, či bol cyklus IVF úspešný a či ste tehotná, overí lekár po 12 dňoch až 2 týždňoch od odberu vajíčok. Ak sa vám otehotnieť nepodarilo, prestanete užívať hormonálne prípravky a menštruáciu pravdepodobne dostanete do jedného týždňa.

Ovariálna rezerva a jej význam

Odklad materstva po 30. roku života ženy je čoraz väčším trendom. Ženy sa pred založením rodiny chcú venovať kariére a predtým, ako sa stanú matkami na plný úväzok, majú v pláne vo svojej kariére dosiahnuť maximum. Často si však neuvedomujú, že s pribúdajúcimi rokmi môže byť pravdepodobnosť otehotnenia podstatne znížená. Ovariálna rezerva, teda množstvo vajíčok, ktoré sa nachádzajú v tele ženy, sa vyvíja už počas embryonálneho života. To znamená, že o tom, koľko vajíčok máte, nerozhodujete vy samy, ale rozhodnuté bolo za vás. Každá žena má po svojom narodení inú ovariálnu rezervu a počas života sa už nové vajíčka nevytvárajú. Skutočný vek u mnohých žien teda nemusí korešpondovať s vekom ovariálnym. Sú ženy, ktoré sa narodili s takou malou ovariálnou rezervou, že sa zrazu ocitnú v predčasnej menopauze a v prípade, že túžia po bábätku, musia vstúpiť do darcovského programu.

Folikuly a Anti-Müllerian hormón (AMH)

Vo vaječníkoch ženy sú vajíčka uložené v štruktúrach, ktoré nazývame folikuly. Pre otehotnenie je najdôležitejší tzv. dominantný folikul, z ktorého sa uvoľňuje vajíčko pri ovulácii, a nazýva sa Graafov folikul. AMH je skratkou pre Anti-műllerian hormón, molekulu, ktorú produkujú bunky folikulov. Vyšetrenie AMH by ste teda nemali podstúpiť len v prípade, že sa vám nedarí dieťatko počať, ale i preventívne, ak máte medzi 27 - 38 rokom života a plánujete odklad materstva.

Laboratórne metódy a ich význam pri IVF

Srdcom každej kliniky asistovanej reprodukcie je laboratórium, keďže práve to zohráva pri úspešnosti liečby kľúčovú úlohu. Hoci laboratórne metódy nie sú hradené zo zdravotného poistenia (s výnimkou príspevku na ICSI pre poistencov UNION), ich použitie môže výrazne zvýšiť šancu na úspešnú liečbu.

Metódy separácie spermií

Zrelé spermie žijú iba niekoľko dní. Na konci ich životného cyklu sa u nich zvyšuje výskyt poškodení DNA, čo predstavuje asi 15 % zo vzorky. Spermie musia pri tejto metóde preplávať cez špeciálne kanáliky, ktoré odfiltrujú tie s morfologickými abnormalitami a so zmenami bunkovej membrány spôsobenej DNA fragmentáciou.

Určenie zrelosti vajíčka a metódy oplodnenia

Zrelosť vajíčka sa určuje pomocou dvoch dôležitých štruktúr vo vajíčku: polárneho telieska a deliaceho vretienka. Polarizačná mikroskopia dokáže odhaliť aj jemné detaily a štruktúry vajíčka, vrátane deliaceho vretienka. Princíp metódy ICSI spočíva v oplodnení zrelého vajíčka zavedením spermie pomocou tenkej ihly priamo do vajíčka. Spermia je vybratá na základe jej tvaru a pohyblivosti, alebo je možné pred ICSI doplniť niektorú z metód PICSI, IMSI, prípadne MSS alebo MACS. Táto metóda sa dá aplikovať iba pri mimotelovom oplodnení (IVF) a eliminuje sa ňou mužský faktor neplodnosti, najmä nízka pohyblivosť a koncentrácia (počet) spermií. Metóda PICSI využíva fakt, že iba zrelá spermia má na svojom povrchu väzbové miesta pre kyselinu hyalurónovú, ktorá je súčasťou obalu vajíčka.

Intracytoplazmatická injekcia morfologicky selektovanej spermie (IMSI): Založená na maximálnom mikroskopickom zväčšení spermie, vďaka čomu vie embryológ hodnotiť aj minimálne defekty tvaru spermií.
Test vitality spermií: Ide o špeciálne médium (roztok), určené pre odlíšenie živých spermií od tých neživých.
Asistovaná aktivácia vajíčka (AOA): Keď sa vajíčko stretne so spermiou spustí sa tzv. aktivácia vajíčka (oocytu), ktorou začína proces oplodnenia a vývoja embrya. Ak spermia nemá tieto faktory, prípadne na ne vajíčko nezareaguje správne, aktivačný proces sa nemusí uskutočniť a oplodnenie môže zlyhať.

Predĺžená kultivácia embryí a ďalšie metódy

V rámci predĺženej kultivácie je možné embryo sledovať až do piateho prípadne šiesteho dňa. Vďaka tomu vieme urobiť transfer iba takých embryí, ktoré sa dostali do štádia blastocysty a tým podstatne zvýšiť šance, že bude liečebný cyklus úspešný a povedie k tehotenstvu.

Time-lapse inkubátor EmbryoScope+: Umožňuje sledovať vývoj embryí počas celej doby kultivácie nepretržite a oveľa podrobnejšie.
Asistovaný hatching: Podstatou tohto výkonu je narušenie obalu pomocou špeciálneho laseru a vytvorenie malého otvoru tesne pred prenosom embrya do maternice.
EmbryoGlue: Kultivačné médium (roztok), špeciálne vyvinuté na prenos embryí, obsahujúce vysokú koncentráciu niektorých látok (hyaluronanu a rekombinantného ľudského albumínu), ktoré pomáhajú napodobniť podmienky v maternici a zvýšiť priľnavosť embrya k jej sliznici.

Ďalšie vyšetrenia spermií a metódy výberu spermií

Na základe vyšetrenia spermiogramu môžeme okrem počtu, objemu, pohyblivosti alebo morfológie spermií posúdiť aj stupeň poškodenia (fragmentácie) ich DNA. Pri diagnostike faktorov mužskej neplodnosti je dôležitým parametrom okrem iného stanovenie podielu nezrelých spermií v ejakuláte. Na zistenie oxidatívneho stresu používame najrýchlejší a najpresnejší test MIOXSYS.

Magneticky aktivovaná separácia spermií (MACS): Táto metóda je určená na výber najkvalitnejších spermií na insemináciu pacientky alebo na oplodnenie vajíčok technikami ICSI a PICSI.
Špeciálne médium na aktiváciu spermií: Pridaním média do vzorky úplne nepohyblivých spermií sa aktivujú energetické rezervy živých spermií, ktoré získajú pohyblivosť.

Ďalšie metódy pre úspešné IVF

MOON (Mature Oocytes Only): Pomáha stanoviť najvhodnejší okamih pre mikromanipulačné oplodnenie vajíčok spermiami (ICSI).
Kultivačné médium s rastovým faktorom GM-CSF: Vďaka nemu sa embryo nielen lepšie vyvíja, ale aj komunikuje s sliznicou maternice.
Vyšetrenie sliznice maternice: Problém s úspešným počatím môže spôsobovať sliznice maternice, ktorá nemusí byť na transfer dostatočne pripravená.

Príspevky na úkony súvisiace s asistovanou reprodukciou

Spolu vám prispejeme až 1 200 eur na úkony súvisiace s asistovanou reprodukciou. Na Slovensku existuje komerčné poistné krytie neplodnosti, pričom zdravotné poisťovne hradia tri cykly mimotelového oplodnenia ženy do dovŕšenia 39.

Alternatívy k IVF

Intrauterinná inseminácia (IUI): Znamená vloženie spermií priamo do maternice v čase ovulácie. Mať svoju vlastnú rodinu a dieťa je prirodzeným snom každého človeka. Až 1 zo 6 párov je v súčasnosti neplodný a až 17 % párov trpí vážnymi poruchami plodnosti. Mimotelové, alebo hovorovo umelé oplodnenie (z angl. In vitro fertilization, skratka IVF) je jedným z typov techník asistovanej reprodukcie.

Kroky mimotelového oplodnenia:

Prvým krokom je úvodná konzultácia v centre asistovanej reprodukcie.
U žien ide štandardne o hormonálne, imunologické a ultrazvukové vyšetrenie.
Pre podstúpenie mimotelového oplodnenia je nevyhnutné získať väčší počet zrelých vajíčok. Preto sa vaječníky stimulujú podávaním hormónov.
Po hormonálnej stimulácii nasleduje odber vajíčok, ktoré dozreli vo folikuloch. Vajíčka sa odsajú z vaječníkov (ovárií) vpichom cez pošvu pod ultrazvukovou kontrolou. Folikulárna tekutina s vajíčkami sa zbiera do skúmavky, ktorá sa odovzdáva do embryologického laboratória. Zákrok sa robí v krátkej celkovej anestézii.
Odber spermií najčastejšie prebieha v rovnaký deň ako mimotelové oplodnenie v tzv. odberovej miestnosti v centre asistovanej reprodukcie.
Po úspešnom odbere vajíčok a spermií sa vajíčka oplodnia v laboratóriu. Najúčinnejšou metódou pri liečbe ťažších foriem mužskej neplodnosti je metóda ICSI (intracytoplazmatická injekcia spermie do vajíčka). Ide o mechanické vpravenie jednej spermie do vajíčka pomocou mikroihly pod špeciálnym mikroskopom.
Kultivácia prebieha po odbere vajíčok, presnejšie po ich oplodnení spermiami a trvá dva až tri dni.
Embryotransfer je prenos embrya do maternice, ktorý nasleduje po jeho úspešnej kultivácii v inkubátore. V prípade transferu už predtým mrazeného embrya hovoríme o tzv. kryoembryotransfere. Pacientka otehotnie, ak sa niektoré z embryí uhniezdi na sliznici maternice. Po transfere je vhodné odpočívať a zbytočne nezaťažovať telo fyzickou aktivitou. Desiaty až štrnásty deň po embryotransfere príde pacientka na tehotenský test (odberom krvi sa zistí hladina hormónu hCG).
V centrách asistovanej reprodukcie sa používajú aj doplnkové metódy, ktoré zvyšujú pravdepodobnosť otehotnenia hneď počas prvého cyklu mimotelového oplodnenia. Medzi tieto metódy patrí napríklad preimplantačné genetické vyšetrenie embryí alebo špeciálne vyšetrenia spermií (EmbryoGlue).

Mimotelové oplodnenie môže byť emocionálne náročné ako pre pár, tak i pre celú rodinu. Nie je výnimkou, že páry, ktoré podstúpia mimotelové oplodnenie bojujú počas celého procesu s obavami a strachom z neúspechu. Možné zdravotné riziká spojené s liečbou neplodnosti sa dajú vďaka odbornosti lekárov a moderným technológiám redukovať na minimum. Na Slovensku existuje komerčné poistné krytie neplodnosti, pričom zdravotné poisťovne hradia tri cykly mimotelového oplodnenia ženy do dovŕšenia 39.

Pre optimálnu voľbu metódy oplodnenia vajíčok je potrebná podrobná analýza kvality spermií. Preto pred začatím liečby okrem základného spermiogramu vyšetrujeme aj tzv. Ak sú výsledky spermiogramu, postkoitálneho testu (PCT) a funkčných testov (TW a IBT) v poriadku, a aj napriek tomu sa páru nedarí spontánne otehotnieť, býva lekárom odporučené oplodnenie klasickou metódou.

Pokiaľ bol u muža zistený znížený počet spermií, znížená pohyblivosť alebo morfológia spermií, nemusí byť metóda klasického oplodnenia efektívna. ICSI je mikromanipulačná metóda, pri ktorej embryológ pomocou mikropipety vpraví spermiu priamo do vajíčka. Celý proces sa vykonáva pomocou mikromanipulátora pod kontrolou mikroskopom. Alternatívou tejto metódy je metóda PICSI, ktorá vám môže byť odporúčaná v prípade, že je v ejakuláte obsiahnuté veľké množstvo spermií s poškodenou DNA. Pri tejto metóde sú spermie inkubované v Petriho miske, ktorej dno je pokryté hyaluronanom.

Pre ICSI sú následne vyberané iba spermie naviazané na hyaluronan. Hyaluronan je mukopolysacharid, ktorý sa prirodzene vyskytuje ako súčasť medzibunkovej hmoty obklopujúcej spolu s kumulárnymi bunkami vajíčko. Aby mohla spermia pri prirodzenom oplodnení úspešne preniknúť do vajíčka a oplodniť ho, musí byť schopná viazať sa k hyaluronanu. Takéto interakcie je schopná iba zrelá spermia. Výhodou metódy PICSI je teda predovšetkým objektívna možnosť výberu spermií na základe ich adekvátnych funkčných vlastností. Je dôležité si uvedomiť, že na základe rovnakého princípu sú vyberané spermie aj pri prirodzenom oplodnení prebiehajúcom v tele ženy. Ak v ejakuláte nie sú prítomné žiadne spermie (azoospermia), je možné pokúsiť sa o ich získanie chirurgickým odberom.

V prípade porúch transportu spermií do nadsemenníka volíme techniku TESE (testicular sperm extraction), pri ktorej je chirurgicky odobraný malý kúsok zárodočného epitelu zo semenníka. Základom liečby neplodnosti je zistiť jej príčinu. Týka sa to vyšetrenia oboch potenciálnych rodičov - ženy i muža. Spolu vám prispejeme až 1 200 eur na úkony súvisiace s asistovanou reprodukciou. Asistovaná reprodukcia neznamená hneď IVF (in vitro fertilization).

Umelé oplodnenie prebieha mimo tela ženy, v laboratóriu. IUI - intrauterinná inseminácia znamená vloženie spermií priamo do maternice v čase ovulácie. Spermie to tak majú bližšie k vajcovodu a vaječníkom, čo zvyšuje pravdepodobnosť otehotnenia. Táto metóda je vhodná napríklad práve pri mužskej neplodnosti, napríklad pri zníženej pohyblivosti či počte spermií.IUI môžete podstúpiť aj vtedy, ak využijete darcovské spermie, ak je vaším problémom endometrióza či znížená priechodnosť krčka maternice.

Od muža je potrebný ejakulát, ktorý sa následne čistí a koncentruje. U ženy zvyčajne prebehne pred vložením spermií hormonálna stimulácia vaječníkov, aby sa vytvorilo čo najviac vajíčok a zvýšila sa pravdepodobnosť otehotnenia. Lekár urobí ultrazvuk, aby zistil presný čas ovulácie. V správnom čase pomocou katétra vloží cez pošvu a krčok maternice do vnútra maternice pripravené spermie. V niektorých prípadoch lekár navrhne hneď IVF. Pri IVF už oplodnenie (spojenie spermie a vajíčka) neprebieha v tele matky, ale v laboratóriu. Pri IVF spermia do vajíčka vojde prirodzene, bez ďalšieho zásahu, na rozdiel od metódy ICSI.

ICSI znamená, že v laboratóriu „pomôžu“ spermii dostať sa do vajíčka. ICSI je intracytoplazmatická injekcia spermie a je zákrokom, pri ktorom spermia vchádza do vajíčka ihlou.ICSI môžete podstúpiť napríklad pri nízkom počte spermií, nedostatočne pohyblivých spermiách alebo vysokom počte poškodených spermií v ejakuláte. Vyselektujú sa len zdravé, nepoškodené spermie. Je to upravená metóda ICSI, pri ktorej sa použijú len zrelé a geneticky vyšetrené spermie. KET je kryoembryotransfer. Predimplantačná genetická diagnostika znamená genetické vyšetrenie embrya vo včasnom štádiu jeho vývoja. Lekári testujú špecifické genetické choroby, overujú správny počet chromozómov.

Embryá, ktoré sú geneticky v poriadku, môžu byť vložené do vašej maternice. Myšlienka, že vám niekto pomôže s otehotnením vlastného dieťaťa, keď sa vám nedarí prirodzenou cestou, je lákavá. Ako každý lekársky zákrok, aj tieto metódy majú svoje riziká. Mali by ste poznať základné princípy umelého oplodnenia - najmä to, čo sa robí s embryami, ktoré budú vytvorené, tiež napríklad to, aké máte možnosti, čo sa týka rozhodovania o počte embryí, ktoré vám budú vložené do maternice. Ak využijete darcovské vajíčka alebo spermie, ujasnite si svoje postoje k „cudziemu“ genetickému materiálu. Metódy IVF nie sú stopercentne úspešné, snažte sa pristupovať k nim triezvo, aby ste dokázali bez obviňovania spracovať prípadné sklamanie z neúspechu.

Možné riziká:

Ovariálny hyperstimulačný syndróm spôsobený hormonálnymi injekciami na stimuláciu vaječníkov. Ide o asi týždeň trvajúce bolesti brucha, nafukovanie, nevoľnosť, vracanie a hnačky. Ak otehotniete, príznaky môžu pokračovať aj niekoľko týždňov.
Mimomaternicové tehotenstvo - v prípade, že sa oplodnené vajíčko usídli inde, než sa má.

Mali by ste vedieť, že pri umelom oplodnení môže vzniknúť viac embryí, no do vašej maternice vložia zvyčajne len jedno. Ak chcete ísť šťastiu naproti, spoľahnite sa na metódy, ktoré zvyšujú úspešnosť IVF. Na základe vyšetrenia spermiogramu môžeme okrem počtu, objemu, pohyblivosti alebo morfológie spermií posúdiť aj stupeň poškodenia (fragmentácie) ich DNA. Pri diagnostike faktorov mužskej neplodnosti je dôležitým parametrom okrem iného stanovenie podielu nezrelých spermií v ejakuláte.

Použité farbivo (eozín) totiž prenikne iba do mŕtvej spermie. Oxidatívny stres ovplyvňuje kvalitu a funkčnosť spermií a spôsobuje poškodenie ich DNA. Na zistenie oxidatívneho stresu používame najrýchlejší a najpresnejší test MIOXSYS. Najčastejšie používaná mikromanipulačná technika, pri ktorej sa do každého vajíčka aktívne prenáša jedna spermia. Modifikácia metódy ICSI spojená s výberom optimálnej spermie. Spermie majú obmedzenú životnosť a umierajú apoptózou.

Apoptotické spermie sa za normálnych okolností nedajú odlíšiť od normálnych spermií. Táto metóda je určená na výber najkvalitnejších spermií na insemináciu pacientky alebo na oplodnenie vajíčok technikami ICSI a PICSI. Pridaním média do vzorky úplne nepohyblivých spermií sa aktivujú energetické rezervy živých spermií, ktoré získajú pohyblivosť. Pomáha stanoviť najvhodnejší okamih pre mikromanipulačné oplodnenie vajíčok spermiami (ICSI). Po oplodnení vajíčka spermiami embryológovia embryá sledujú a starajú sa o ich úspešný vývoj. Médium obsahujúce dôležitý rastový faktor GM-CSF. Každé embryo najlepšie prosperuje v tele ženy.

Inkubátor MIRI TL ponúka embryám tú najlepšiu starostlivosť, pohodlie a vlastný priestor. Problém s úspešným počatím môže spôsobovať sliznice maternice, ktorá nemusí byť na transfer dostatočne pripravená. Vyšetrenie, ktoré zahŕňa tri testy z jednej vzorky sliznice maternice. Test je určený pre všetky ženy, ktoré počas liečby metódami asistovanej reprodukcie získali malý počet embryí alebo u ktorých sa opakovane nepodarilo implantovať embryo. Glue je špeciálne kultivačné médium s obsahom hyaluronanu, ktoré funguje ako „lepidlo“. Kultivačné médium s obsahom rastového hormónu, vďaka ktorému sa embryo nielen lepšie vyvíja, ale aj komunikuje s sliznicou maternice.

Na prvý pohľad pritom nemusí existovať žiadny problém. Menštruácia prichádza pravidelne každý mesiac, nepociťujete žiadne ťažkosti a vašou jedinou návštevou gynekológa je preventívna prehliadka, na ktorej vám lekár oznámi, že ste v poriadku. Bohužiaľ, nejde len o ženy, ktoré prekročili 35. rok svojho života. K rizikovým skupinám patria síce najmä ženy, u ktorých je predispozícia na predčasnú menopauzu, podstúpili operácie vaječníkov alebo hoci i v detstve si prešli chemoterapiou. Avšak je dôležité opäť podotknúť, že existuje veľa žien, ktoré nespadajú do žiadnej z rizikových skupín a aj napriek tomu majú ovariálnu rezervu zníženú.

tags: #vyšetrenie #počtu #vajíčok #metódy